PGT-A: преимплантационное генетическое тестирование анеуплоидий

Преимплантационное генетическое тестирование анеуплоидий (PGT-A, ранее известное как PGS) — один из ключевых методов повышения эффективности программ ЭКО. Тест позволяет определить числовые хромосомные аномалии эмбриона ещё до его переноса в полость матки, что существенно снижает риск неудачной имплантации и невынашивания беременности.

Для ЭКО-клиник, развивающих собственную генетическую лабораторию, внедрение PGT-A — стратегический шаг, который требует не только квалифицированного персонала, но и правильно подобранного оборудования.

Зачем нужен PGT-A

Анеуплоидия — изменение числа хромосом — является наиболее частой причиной отторжения эмбриона и ранней потери беременности. По различным данным, от 40 до 60 % эмбрионов, полученных в циклах ЭКО, имеют хромосомные аномалии. С возрастом пациентки этот процент значительно возрастает.

PGT-A позволяет отобрать эуплоидные (хромосомно нормальные) эмбрионы для переноса, что повышает частоту имплантации и снижает риск многоплодной беременности при переносе одного эмбриона.

Этапы PGT-A: от биопсии до результата

Рабочий процесс PGT-A включает несколько последовательных этапов, каждый из которых предъявляет специфические требования к оборудованию:

• Биопсия трофэктодермы — забор 5–10 клеток с помощью лазерной системы и микроманипулятора на стадии бластоцисты (день 5–6).
• Амплификация ДНК (WGA) — полногеномная амплификация единичных клеток с использованием специализированных китов (SurePlex, MALBAC, PicoPLEX).
• Подготовка библиотеки — энзиматическая обработка и лигирование адаптеров для секвенирования.
• Секвенирование (NGS) — запуск на платформе Illumina (MiSeq, MiniSeq, NextSeq) или Ion Torrent.
• Биоинформатический анализ — обработка данных с помощью специализированного программного обеспечения (BlueFuse Multi, Ion Reporter, ReproSeq).
• Выдача заключения — определение хромосомного статуса каждого эмбриона (эуплоидный, анеуплоидный, мозаичный).

Необходимое оборудование для PGT-A

Полноценная лаборатория PGT-A требует следующего комплекта оборудования:

• NGS-секвенатор — Illumina MiSeq или MiniSeq (для малых объёмов), NextSeq 550/2000 (для крупных лабораторий).
• Термоциклер — для амплификации ДНК и подготовки библиотек (например, Applied Biosystems Veriti, Bio-Rad T100).
• Ламинарный бокс класса II — для работы с единичными клетками в стерильных условиях.
• Микроцентрифуга — для осаждения и промывки образцов.
• Система количественного определения ДНК — флуориметр (Qubit) или спектрофотометр (NanoDrop).
• Магнитный штатив — для очистки библиотек на магнитных шариках (AMPure XP).
• Вортекс и мини-центрифуга — для рутинных процедур пробоподготовки.
• Компьютерная станция — с достаточной мощностью для биоинформатического анализа данных NGS.

NGS vs. aCGH: выбор технологии

Исторически PGT-A проводился методом сравнительной геномной гибридизации на микрочипах (aCGH). Сегодня большинство лабораторий перешли на NGS, который обеспечивает более высокую разрешающую способность и позволяет выявлять мозаицизм.

NGS-платформы отличаются гибкостью: количество образцов на один запуск варьируется от 24 до 96 и более, что позволяет оптимизировать себестоимость анализа. Кроме того, NGS открывает возможность параллельного проведения PGT-A и PGT-SR на одной платформе.

Контроль качества и аккредитация

Генетическая лаборатория, выполняющая PGT-A, должна соответствовать стандартам качества. Ключевые аспекты:

• Валидация методов — каждая платформа и реагентный набор проходят внутреннюю валидацию перед клиническим использованием.
• Внешний контроль качества — участие в программах внешней оценки качества (EQA), например, от GenQA (UK NEQAS) или CEQAS.
• Документирование — полная прослеживаемость от образца до заключения.
• Стандарты ISO 15189 — для лабораторий, стремящихся к международной аккредитации.

KombiMED: комплексное оснащение лаборатории PGT-A

KombiMED GmbH поставляет полный комплект оборудования и расходных материалов для лабораторий преимплантационной генетической диагностики. Мы работаем с ведущими европейскими производителями и обеспечиваем техническое сопровождение — от проектирования лаборатории до обучения персонала. Свяжитесь с нами для получения индивидуального предложения.